美国应用生物系统公司
法医及亲子鉴定数据分析软件GeneMapper ID v3.1 中文操作手册
(Rev B。仅供参考。请阅读英文原版手册。)
ABI中国公司技术服务部x 2004年
目录
概述 (2)
快速入门指南 (3)
中文手册 (5)
一. 安装及登录 (5)
二. 设置参数 (5)
三. 分析数据 (6)
四. 输出结果 (7)
概述
GeneMapper是高通量、高自动的DNA片段分析和基因分型软件,功能上相当于GeneScan、Genotyper和Template的整合,应用上分4类:基于STR连锁分析的基因组扫描,基于STR遗传分析的亲子鉴定,基于单碱基延伸的SNP分析,和基于寡核苷酸连接(OLA)的大规模SNP分析。其中GeneMapper ID v3.1是亲子鉴定的专业软件。
GeneMapper以Project为单位管理数据,之下划分4个层次,依次为Kit (应用)、Panel (位点组,相当于Bin Set)、Locus(位点,相当于Marker)和Allele (等位基因,相当于Bin)。kit 是各种AmpFlSTR试剂盒的总称;Panel是一组Marker,即日常所指的试剂盒,如Identifiler、Profiler Plus、COfiler等。Panel所包
含的全部位点及其起止范围的定义称为Bin Set。Locus 就是STR位点,如D16S539、TH01等。Allele是等位基因。对人而言,STR位点可以有几种到几十种等位基因;对个体而言,只有1种(纯合子)或者2种(杂合子)。每个Allele的起止点、颜、属于哪个Marker等定义称为Bin。
软件操作分3步:设置参数,分析数据,编辑结果。参数设置主要是输入Panel和Bin。亲子鉴定的Panel和Bin由ABI公司提供。分析参数只需设置1次,以后直接调用。分析完成后,软件会对每个计算步骤都进行质量控制并评分,赋以颜标志:红表示失败,需要重新实验;黄表示有疑问,需要查验原始图谱;绿表示成功,无需干预。软件按红、黄、绿的顺序排列结果。这样,在处理大批数据时,只需编辑为数不多的黄标志数据,不必一个一个检查,可以节省大量时间。
快速入门指南
1. 开机
开显示屏,开电脑,开GeneMapper ID v3.1软件。登录软件的初始用户名为gmid,无密码。第一次登录软件要求用户指定自己的密码。进入软件后也可以设立新的用户帐户。
2. 输入Panel和Bin
输入Panel:从Tools菜单打开Panel Manager,选中位于左边浏览窗的Panel Manager,从File菜单中选
择Import Panels,浏览到Panel文件AmpFLSTR_并选中,点Import,软件即在浏览窗中新建一个kit文件夹AmpFLSTR_Panels_v1。
输入Bin:选中AmpFLSTR_Panels_v1文件夹,从File菜单中选择Import Bin Set,浏览到Bin文件AmpFLSTR_并选中,点Import输入。
点OK保存数据到oracle数据库,关闭窗口。
查看Panel和Bin:打开Panel Manager,点选AmpFLSTR_Panels_v3文件夹,右边的窗口中即列表显示该文件夹中的全部Panel (Profiler Plus、Identifiler等);展开kit文件夹,点选其中的一个Panel如Identifiler,右边即显示该Panel中的Maker列表,如D8S1179、TH01、vWA 等;展开Panel文件夹,点选其中的Maker,右边窗口即显示该Maker的Bin图谱。
查看完毕,点OK关闭Panel Manager。
3. 设置分析方法
从Tools菜单中选择打开GeneMapper Manager,其中包括Projects、Analysis Methods、Table Settings、Plot Settings、Matrices和Size Standards5项内容。
点Analysis Method标签,点New建立新方法:类型选HID,点OK打开Analysis Method Editor。在General窗口取名HID_Classic;在Alleles窗口的Bin Set选AmpFLSTR_Bins_v1;在Peak Detector窗口选Basic算法,指定阈值为150点;Peak Quality和Quality Flags参数可以不作修改,点OK保存。
点Table Settings标签,点New打开表格设置页面。在General窗口取名;根据需要选择项目打钩,OK。
点Plot Settings标签,点New打开图谱设置页面。在General窗口取名;根据需要选择项目打钩,OK。
4. 设置默认值
在主页面的Tools菜单中选择Options。在Startup窗口选择Open Blank Project,在Add Samples窗口的各项参数选择Read from the sample,不设Sequence Collector,在Analysis窗口选择自动将失败的数据列于前面,在Users窗口添加新用户的帐户和密码,点OK关闭窗口。
5. 分析数据
在主页面的File菜单选择Add Samples to Project,浏览到、选中样品文件所在的文件夹,点Add to List,点Add,样品文件即显示在Project主窗口中。
点击Analysis Method列的第一个空格,在弹出的窗口中选方法HID_Classic,Fill Down;点Panel,选Id
entifiler或Profiler Plus等,Fill Down;点击Size Standard,选CE_F_HID_GS500或者CE_G5_HID_GS500或者377的对应分子量文件,Fill Down。
点击大绿分析按钮,出现Save Project对话框,取名保存后,软件即开始处理数据,计算完毕左下角显示Analysis completed。
6. 编辑结果
在Size Match Editor中确定Size Standard的片段大小是否吻合。在定义分子量内标的时候,250 bp片段定义为0,由软件计算其实际大小。这个数字一般是246左右。它可以作为一个标志,用来判断不同样品的电泳迁移速率是否一致,只有该值相差不到1 bp,才可认为这些样品可以相互比较。
在Sample页面,选中一个样品(一个样品对应一行),再点Display Plot按钮,即可打开电泳图谱。图谱可以按颜分开单显示,可以任意多种颜同时显示,也可以将不同样品的数据叠加在一起显示,便于相互比较。电脑软件editor
在Genotype页面,软件列表显示基因分型结果。选择表格设置文件,可以得到简明的实验报表。该表以文本文件格式输出,可以用Excel打开。选中一个位点(一个位点对应一行),再点Display Plot按钮,即可打开该位点的图谱,确认或修改基因分型。
7. 输出CODIS
从Tools菜单选择CODIS Export Manager,从中可以增加Specimen Type (软件中目前的Specimen Type被CODIS接受)、source lab ID和destination lab ID。
从File菜单中选择Open,打开一个Project,进入Samples页面,对每一row作适当的选择:ladder和control选No Export,样品选forensic unknown。从File菜单中选择Export Table for CODIS,输入文件名,输出文件类型选择CMF 1.0,选实验室ID和路径,点Export。
ABI Prism  GeneMapper ID v3.1中文手册
1. 安装及登录
1.1  软件安装
必须以管理员权限(Administrator)登陆本机(Local)才能安装GeneMapper ID v3.1软件。对系统的要求为:英文版Windows NT v4.0 (SP5)或者Windows 2000 Professional (SP3)操作系统,区域和语言设置为English(USA);奔腾III处理器以上;大于256M RAM;可用硬盘大于6G。在oracle安装之前TCP/IP必须安装好。要求single-processor电脑,不能在dual-processor Pentium电脑上安装。
如果电脑上有其他版本的GeneMapper软件,请首先通过控制面板的Add/Remove Program卸载,并手工删去GeneMapper文件夹,然后安装。安装时间在1小时左右,中间请勿打断安装进程。
如果电脑显示安装成功而软件不能启动,请首先确认Oracle数据库是否正确安装:进入Start > Programs > Accessories > Command Prompt, 输入sqlplus回车, 显示SQL*Plus: Release 8.1.7.0.0, user-name输入system回车, password输入manager回车。如果显示成功联结到数据库,说明安装成功;否则需要手工设置数据库:输入exit回车,退出SQLPlus;输入cd /d x:\Appliedbiosystems\GeneMapper\database,其中x是软件所在的路径,回车;输入ifadb x:\oraclegm\oradata\ifa回车,如果显示很多行的成功字样,说明设置成功;如果显示错误,重复手工设置步骤,当DOS窗口关闭后,即可启动软件。
如果Oracle数据库安装不正确,请卸掉GeneMapper ID v3.1软件,重新安装。
1.2  软件登录和退出
首次登陆软件要求输入用户名、公司名和注册码。注册成功后,显示登录页面,初始用户名为gmid,密码为空白,点OK后出现密码设置对话框,用户自己设置一个6-10字母的密码。然后登录软件。登录软件后,可以在Users窗口建立更多的用户帐户和密码。
日常的开机步骤为:先开显示屏,再启动电脑主机,进入Windows操作系统。待鼠标沙漏消失,电脑启动完成后,双击桌面图标,打开GeneMapper ID v3.1应用软件,软件显示一个空白的Project文件。
退出软件的方法为:从File菜单中选择Logout或者Exit,或者点击X按钮。
2. 参数设置
2.1  输入Panel和Bin
GeneMapper软件为各种HID试剂盒提供预定义的Panel和Bin,直接使用。
输入Panel:从Tools菜单中选择Panel Manager(或点击工具条上的Panel Manager按钮)打开Panel Manager。在左边的浏览窗中选中Panel Manager,从File菜单中选择Import Panels,浏览到Panel文件AmpFLSTR_并选中它,点Import,软件即在浏览窗中建立一个kit文件夹AmpFLSTR_Panels_v1。